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    HAKATA10099-141胎牛血清的保存與溶解

    2017-05-17 瀏覽次數(shù):1447

    血清10099-141血清的溶解與保存
    血清,指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被 除去的 血漿。其主要作用是提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、提供激素和各種生長(zhǎng)因子、提供結(jié)合蛋白 、提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷、對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用。
    1、如果不用,先放置-80℃保存。
    2、如果要用,可于4℃冰箱放置過夜,再在室溫溶解。
    3、溶解好的血清應(yīng)立即分裝,-80℃保存。
    4、保存于-80℃的血清解凍時(shí)應(yīng)先與4℃冰箱放置過夜再在室溫溶解。切勿直接放在室溫溶解。
    細(xì)胞傳代方法
    根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的恃點(diǎn),傳代方法有3種:
    1.懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞傳代
    離心法傳代:離心(1000轉(zhuǎn)/分)去上清,沉淀物加新培養(yǎng)液后再混勻傳代。
    直接傳代法:懸浮細(xì)胞沉淀在瓶壁時(shí),將上清培養(yǎng)液去除l/2一2/3,然后用吸管直接吹打形成細(xì)胞懸液再傳代。
    2.半懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞傳代(雜交瘤)
    此類細(xì)胞部分呈現(xiàn)貼壁生長(zhǎng)現(xiàn)象,但貼壁不牢,可用直接吹
    打法使細(xì)胞從瓶壁脫落下來,進(jìn)行傳代。
    3.貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞傳代
    采用酶消化法傳代。常用的消化液有0.25%的胰蛋白酶液。
    細(xì)胞冷凍保存
    細(xì)胞應(yīng)生長(zhǎng)良好,處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,密度為80%左右。
    2.注意冷凍保護(hù)劑之品質(zhì)。DMSO質(zhì)量要好,應(yīng)無菌且無色。
    3.冷凍保存之細(xì)胞濃度:一般成纖維細(xì)胞1~3x106cells/ml,懸浮細(xì)胞5~10x106cells/ml,上皮細(xì)胞2~5x106。
    4.凍存液的配方是:60%無血清培養(yǎng)液30%血清10%DMSO

    HAKATA10099-141胎牛血清

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