加入收藏 | 設為首頁 | 聯系我們

    產品搜索

    聯系我們

    聯系人:陳經理
    電話:021-56980380
    傳真:
    手機:17321440983
    地址:上海市嘉定區翔江公路518弄D座2樓

    技術文章 / article
    當前位置:首頁 > 技術文章 > calu-1,細胞人肺癌細胞

    calu-1,細胞人肺癌細胞

    2020-05-20 瀏覽次數:931

     

    calu-1,細胞人肺癌細胞

    1) 來源:蒂科生物細胞庫

    2) 形態:貼壁 上皮細胞樣

    3) 含量:>1x106 個/mL

    4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

    5) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

    6) 運輸:順豐發貨

    培養條件:

    培養基:McCoy's 5A+10%FBS(推薦HAKATA貨號:HN-FBS-500)

    溫度:37℃     氣相:95%空氣,5%二氧化碳

    傳代

    1.用75%酒精噴灑整個培養瓶消毒,將其平躺置于培養箱中進行1-3小時的緩沖,.然后置于無菌操作臺,打開瓶口,將其中的培養液去掉,再往其中加入5-6mL新鮮培養基(以T25培養瓶為例)并置于細胞培養箱中培養,根據細胞生長狀況及培養基顏色變化對其進行換液以及傳代,一般2到3天換一次液

    2.待細胞長滿瓶底面積80%-90%,需要對其進行傳代,傳代比例為1:2到1:4

    3傳代步驟:將0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°預熱,倒掉培養瓶中的培養基,往培養瓶中加入3-5 ml PBS,輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1-2 ml預熱好的胰酶,置于37°孵育消化(diyi次消化需時常取出置于顯微鏡下觀察,以顯微鏡下細胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細胞脫落為jia消化時間,記錄jia消化時間,以便于下次消化),消化好后加入3ml*培養基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后收集細胞懸液,1200rpm離心3min,棄上清,加入*培養基重懸細胞,進行傳代。

    凍存:

    建議使用本公司無血清細胞凍存液貨號:H-W-100,用4度保存的冷凍液直接重懸細胞,不能預熱后使用。

    保存條件:液氮存儲

    溫馨提示(常見問題,處理方式

    T25瓶為例;

    1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml*培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

    2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。

    3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

     

    對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

    1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

    2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。

    3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。

    4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

     

    注:diyi次傳代推薦傳代比例為1:2,以后傳代比例可根據客戶需要自己決定。

    細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存

     

    蒂科生物論文基金獎勵方法

    獎勵對象:

    使用HAKATA系列產品(HAKATA全系列:血清、凍存液、試劑、細胞株等)培養細胞并在中文核心期刊雜志或SCI期刊雜志發表文章,且文章中材料和方法欄中標注我公司品牌名或公司名(英文:HAKATA或Shanghai Chuanqiu Biotechnology Co.,Ltd, China,中文:HAKATA或蒂科生物)

    該獎勵方案長期有效,歡迎大家與我們分享獲得成果的喜悅!

    calu-1,細胞人肺癌細胞

    化工儀器網

    推薦收藏該企業網站
    主站蜘蛛池模板: 精品视频午夜一区二区| 波多野结衣精品一区二区三区| 人妻夜夜爽天天爽爽一区| 亚洲一区欧洲一区| 国产成人综合亚洲一区| 91精品乱码一区二区三区| 日韩免费视频一区二区| 波多野结衣中文字幕一区二区三区 | 在线观看一区二区三区视频| 日韩在线不卡免费视频一区| 色狠狠一区二区三区香蕉蜜桃| 国产精品一区不卡| 国精产品999一区二区三区有限| 午夜福利一区二区三区高清视频| 一区二区在线免费视频| 午夜肉伦伦影院久久精品免费看国产一区二区三区 | 精品一区二区ww| 成人精品一区二区户外勾搭野战| 中文字幕一区二区三区日韩精品| 国产在线观看91精品一区| 亚洲av无码一区二区三区人妖| 在线成人一区二区| 国产精品揄拍一区二区| 亚洲一区二区三区不卡在线播放| 色婷婷一区二区三区四区成人网 | 日韩亚洲AV无码一区二区不卡| 熟女少妇精品一区二区| 亚洲一区二区三区影院| 亚洲午夜精品一区二区| 亚洲欧洲精品一区二区三区| 精品国产一区二区三区香蕉| 国产精品乱码一区二区三| 国产一国产一区秋霞在线观看| 免费观看日本污污ww网站一区| 亚洲片国产一区一级在线观看| 香蕉一区二区三区观| 日韩人妻无码一区二区三区99| 精品无人乱码一区二区三区| 一区二区视频免费观看| 久久人妻内射无码一区三区| 亚洲天堂一区二区三区|