細胞培養中出現黑膠蟲污染怎么辦？

    “黑膠蟲"可寄生于動物細胞，也可以生存于培養基中，依靠細胞和培養基中的營養為生，并隨細胞傳代而傳代。可見“黑膠蟲"是一種異養生物。我們在細胞培養中出現黑膠蟲后污染怎么辦？下面有幾個處理建議，我們一起來了解下吧！

1．換好一點的血清，這樣可以有效減少“小黑點"的形成。一般的血清都不要去滅活處理，為什么呢？

    因為經過正確處理的熱滅活血清，對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進，或*沒有任何作用，甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量，而造成細胞生長速率的降低。而經過熱滅活的血清，沉淀物的形成會顯著增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點"，常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環境中，又會使此沉淀物更增多，使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。除非是在做免疫學研究或培養干細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時，才推薦做熱滅活。所以在不是做免疫學研究或培養干細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞培養時，血清盡量不經熱滅活。

2．如果是貼壁細胞的話，可用無菌的PBS洗幾次，可一定程度上緩解。若是懸浮的話，就不太好處理拉，可以向其中少加一點滋養細胞。加滋養細胞對有黑膠蟲的剛復蘇的細胞很有效！還有就是實驗環境要注意好，保持細胞間整個環境的潔凈度。如果細胞不是非常珍貴，可以用伯氨奎、磺胺、四環素、貝尼爾，也有建議慶大霉素500ug/ml洗滌。

3．換用好的一次性塑料培養瓶。

4．停止復蘇，停止養細胞，*消毒所有用于細胞培養的一切用品，包括所用的培養瓶，培養基，吸管，胰酶，孵箱，超凈臺、空間等等你能想到的和細胞培養相關的所有物品。一個星期后，再復蘇污染之前凍存的細胞，注意你的白大衣衣袖污染即可。這樣你可能覺得動作太大，但可以用一個星期的時間挽救兩個月的時間，還有其他你為了找到污染源，去除污染所耗費的精力，和財力。

5．在換液前先加入生理鹽水并輕輕拍打，沖洗干凈后再加入培養液，堅持天天洗，傳代時加生理鹽水再離心一次，接種密度稍大一些，一段時間后，蟲子就會大大減少，對細胞的生長也不會有大的影響。

    所有東西最好重配；如果實在要搶救，重點突破，留幾瓶污染不是很嚴重的細胞搶救，其余棄去

6．如果有其它可用的細胞，那么污染的細胞最好扔掉；如沒有，可試著用抗生素，可靠的是細菌培養加藥敏，據藥敏結果選擇抗生素，當然不能影響到細胞的狀態。

7．有材料稱minocycline具有一定的作用，可以和換液結合起來使用。

    由于黑膠蟲尚未明確鑒定出是什么生物，所以上述的處理方法不一定正確，可以供考慮采用。

8.有人為尋找到殺滅“黑膠蟲"的方法，做了一個試驗，他取有“黑膠蟲"污染的六孔板，每孔內有2ml培養液，向有污染的孔內分別加入0.5ml、1ml、2ml、3ml的新潔爾滅原液，邊加邊在倒置顯微鏡下觀察。最后他得出結論：新潔爾滅與水或培養基的比例為1：4時即可殺死“黑膠蟲"。但是新潔爾滅對細胞的負面影響太大，比較珍貴的細胞培養最好不采用此方法。

    在細胞培養實驗中，人們遇到的黒膠蟲并不都是一樣的，有像細菌的、有像支原體的、有像原蟲的、有像真菌的，還有像細胞碎片的。在國內個實驗室的器材條件參差不齊，而且實驗人員的操作質量也不盡相同，同一種現象也可能有些許差異，當用描述出來的現象的差異可能變大也可能變小。所以很多人看到細胞被細菌污染了，不好處理，而卻描述出來的現象和流傳的黑膠蟲類似，就會把培養失敗的原因歸結到無法處理的黒膠蟲污染，甚至可能說它發現的是真正的黑膠蟲。這樣的事情多了，黑膠蟲就會人為的變種，像什么的都有。黑膠蟲是否存在，還有待于科學的發展。但有一點可以肯定的，大部分人發現的“黒膠蟲"并不是真正那個未知的黒膠蟲，而是不很常見的細菌、真菌、原蟲等微生物污染。