細胞培養胎牛血清HAKATA，12662-029，北美源，*

★CQ★早期凋亡細胞及活細胞的胞膜正常，DNA染料碘化丙錠(PI)拒染，但可被另外一種DNA染料Hoechst342(Ho342)染色；而壞死細胞的胞膜完整性受到破壞，細胞不需固定即可被PI染色。凋亡細胞的胞膜成分亦發生改變，在凋亡早期，原來位于細胞膜內側的磷脂酰絲氨酸(PS)遷移至脂雙層外側。另外，細胞凋亡時核酸內切酶被激活，首先將DNA切成50～300kb大小的DNA，然后進一步將染色質裂解成單個核小體和寡聚核小體，形成180～200bp的DNA斷。而壞死細胞DNA斷裂無規律性。

一、ISOL檢測法

原理：與TUNEL凋亡檢測法類似，ISOL（In Situ Oligo Ligation，原位寡核苷酸片段連接）也是通過末端標記斷裂DNA的方法。但該方法的創新在于利用ISOL方法，在DNA段的平端或3’端單個突出堿基進行連接擴增，鑒于只有發生凋亡的細胞才會發生平端或3’端單個堿基突出，所以ApopTag 過氧化物酶ISOL凋亡檢測試劑盒能夠明確的區分凋亡細胞和壞死細胞。

優勢：原位特異標記，能夠zui大限度的降低背景，克服TUNEL法檢測的假陽性，適用于石蠟包埋的組織、冰凍組織、貼壁細胞以及懸浮細胞的凋亡檢測。

二、DNA凝膠電泳(DNAladder)

凋亡過程中DNA裂解是標志細胞zui終走向死亡的不可逆的重要過程，DNA凝膠電泳也曾被認為是細胞凋亡判定的金標準之一。抽提細胞的DNA,確定樣品中DNA的量和純度，然后在瓊脂糖凝膠上電泳。正常活細胞的DNA凝膠電泳為一條區帶;細胞凋亡時，由于DNA被裂解成單個核小體和寡聚核小體，電泳時呈現特征性的“階梯狀”(ladder)條帶，壞死細胞的DNA是被隨機破壞的，不能形成階梯狀條帶，電泳時出現類似血涂片的連續性改變。此方法是判斷細胞有無凋亡發生的一種簡便方法，比較適用于體外培養的非增殖性細胞的檢測。

缺點：

(1)特異性較差，特征性的180～200bpDNA梯帶的出現并非凋亡所*，另外在某些罕見的情況下細胞發生凋亡可無DNA斷裂。

(2)不能提供單個細胞或相關細胞的組織學定位或細胞分化等凋亡信息。

(3)不能進行準確定量，只能進行半定量。

(4)靈敏性較差，要求所測標本細胞數在1×106以上才能使電泳清晰。

(5)適用于只含有單一細胞成分標本的測定，對組織細胞組成復雜者，不能確定凋亡發生于哪類細胞。

三、酶聯免疫吸附法（ELISA）核小體測定

ELISA是定量檢測細胞凋亡的免疫化學法，其基本原理是利用夾心ELISA方法檢測細胞凋亡后形成的由組蛋白及DNA斷組成的核小體。在微定量板上吸附抗組蛋白抗體，加入細胞裂解后離心所得的含有核小體的上清液，核小體上的組蛋白與包被的抗組蛋白抗體結合；加入辣根過氧化物酶標記的抗DNA抗體，與核小體上的DNA結合；加酶的底物，測光吸收值。此方法敏感性高，所需細胞數少，可檢測低至5×10²/mL的凋亡細胞。此外，此方法不需特殊儀器，比較適合基層工作。

缺點：

(1)不能測定凋亡發生的量。

(2)適合單一成分細胞的檢測，對于多細胞成分的組織或細胞混合物，不能判定凋亡發生在哪種細胞。

(3)不能提供單個細胞或相關細胞的組織學定位。

品牌1 德國SERANA

產品名稱       貨號    來源       規格

胎牛血清FBS S-FBS-SA-015 SOUTH AMERICA 500ML

胎牛血清FBS S-FBS-US-015 USA 500ML

超低IgG FBS S-FBS-SA-055 SOUTH AMERICA 500ML

透析 FBS S-FBS-US-065 USA 500ML

活性炭/葡聚糖處理FBS S-FBS-AU-045 AUSTRALIA 500ML

正常人AB血清 S-HU-US-011 USA 100ML

品牌2 澳洲BOVOGEN

胎牛血清FBS SFBS SOUTH AMERICA 500ML

胎牛血清FBS SFBS New Zealand 新西蘭 500ML

新生牛血清  SNCS New Zealand 500ML

品牌3 美國HAKATA

胎牛血清FBS 10270-106 SOUTH AMERICA 500ML

胎牛血清FBS c2027050 SOUTH AMERICA 500ML

優等胎牛血清FBS 10091-148 新西蘭 500ML

優等胎牛血清FBS 10437-028 Mexico 500ML

優等胎牛血清FBS 10099-141 AUSTRALIA 500ML

優等胎牛血清FBS 10099-133 AUSTRALIA 100ML

特級胎牛血清FBS 16000-044 USA 500ML

熱滅活 FBS 10082-147 USA 500ML

熱滅活FBS   10100-147 AUSTRALIA 500ML

超低IgG FBS 16250-078 USA 500ML

透析胎牛血清 FBS 264000-044 USA 500ML

活性炭/葡聚糖FBS   12676-029 USA 500Ml

馬血清  16050-122 New Zealand  500ML

熱滅活馬血清 26050-088 New Zealand 500Ml

品牌4 美國Hylone

胎牛血清FBS Sv30087.02 SOUTH AMERICA 500ML

胎牛血清FBS SV30160.03 SOUTH AMERICA 500ML

胎牛血清FBS SH30071.03 USA  500ML

優等胎牛血清FBS SH30084.03 AUSTRALIA 500ML

特級胎牛血清FBS SH30070.03 USA 500ML

特級胎牛血清FBS SH30070.03E USA 500ML

標準胎牛血清FBS SH30370.03 AUSTRALIA 500ML

活性炭/葡聚糖處理 SH30068.03 USA 500ML

透析胎牛血清 SH30079.03 USA 500ML

品牌5 PAA

胎牛血清FBS A15-101 EU 500ML

胎牛血清FBS A15-151 EU 500ML

品牌6 以色列BI

胎牛血清FBS 04-001-1ACS SOUTH AMERICA 500ML

胎牛血清FBS 04-002-1A ES胎牛血清 500ML

品牌7 美國SIGMA

胎牛血清FBS F2442 USA 500ML

品牌8 美國GEMINI

胎牛血清FBS 900-108 SOUTH AMERICA 500ML

胎牛血清FBS 100-700 AUSTRALIA 500ML

胎牛血清FBS 100-500 USA 500ML

科研用人AB血清 100-512 100ML

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產品名稱        貨號  規格

HAKATA 雙抗 15140-122 100ML

HAKATA 胰酶 25200-056 100ml

HAKATA 胰酶 25200-072 500ml

Hylone 雙抗 SV30010 100ML

Hylone 胰酶 SH30042.01 100ML

HAKATA B-27™ 17504-044 10ML

HAKATA B-27™ 12587-010 10ML

Invitrogen TRIzol™ Reagent 15596-026 100ML

SIGMA  DSMO D2650 100ML

BD 基質膠 354234 10ml

BD 基質膠 356234 5ml

Lipo2000 11668-019 1.5ml

Lipo2000 11668-027 0.75

Lipofectamine™ 3000 Transfection Reagent  L3000-008 0.75ml

Lipofectamine™ 3001 Transfection Reagent  L3000-015 1.5ml

瓊脂糖 西班牙原裝 100g

1640培養基 HAKATA貨號：31800-022 10X1L原裝

DMEM(高糖）含丙酮酸鈉 HAKATA貨號：12800017 10X1L原裝

DMEM(高糖) 不含丙酮酸鈉 HAKATA貨號：12100046 10X1L原裝

DMEM(低糖） HAKATA貨號：31600034 10X1L原裝

MEM 培養基 HAKATA貨號：41500034 10X1L原裝

M199培養基 HAKATA貨號：31100035 10X1L原裝

F12培養基 HAKATA貨號：21700075 10X1L原裝

D-MEM/F-12培養基 HAKATA貨號：12400-024 10X1L原裝

IMDM培養基 HAKATA貨號：12200-036 10X1L原裝

蛋白酶K MercK   1245680100 100mg

G418 Life Invitrogen 11811-031 5g

M-MLV Promage 10000u

胰蛋白胨 OXOID  LP0042 500g

酵母粉 OXOID  LP0021 500g

潮霉素B Roche   10843555001 20ml

G418 遺傳霉素 Life Invitrogen 11811023 1g