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    A2780/Taxol細胞- A2780/Taxol耐藥株

    2017-04-12 瀏覽次數:1094

    人卵巢癌紫杉醇耐藥株 A2780/TAXOL細胞功能判定 B細胞受抗原或絲裂原刺激活化后,可發生增殖,并分化為漿細胞合成和分泌各種免疫球蛋白(Ig)B細胞功能低下或缺陷,可表現為體內Ig和血型抗體量下降或缺乏,患者對外源性抗原刺激的免疫應答能力減弱或缺陷,僅產生低滴度甚至不能產生特異性抗體。因此,定量測定受試者血清中Ig的含量,有助于評價人卵巢癌紫杉醇耐藥株 A2780/TAXOL細胞功能是否正常,也是診斷體液免疫缺陷的重要指標。以下簡要介紹檢測B細胞功能常用的體外試驗方法。

    (1)B細胞增殖(轉化)試驗:體外引起B 細胞活化、增殖的刺激物主要有美洲商陸(PWM)、富含SPA的金葡菌Cowan-1(簡稱SAC),細菌脂多糖(LPS,對小鼠B細胞)、抗IgM抗體及EB病毒等。試驗方法與T細胞基本上相同。

    (2)溶血空斑形成試驗:溶血空斑形成試驗是測定產生抗體的人卵巢癌紫杉醇耐藥株 A2780/TAXOL細胞數量和功能的一種經典體外實驗方法。操作原則是將經過綿羊紅細胞(SRBC)免疫的小鼠脾臟(或家兔淋巴結)制成單個細胞懸液,與一定量的SRBC在溫熱的瓊脂糖凝膠內混和均勻后,傾注于小平皿或玻片上成一薄層。置37℃溫育一定時間。由于脾細胞中的抗體生成細胞釋放抗SRBC抗體(溶血素),使其周圍的SRBC致敏。在外加補體參與下,將SRBC裂解,從而在每個Ig分泌細胞即B細胞四周形成一個肉眼可見的溶血空斑。可用肉眼或放大鏡觀察計數,計算1×106個脾細胞中溶血空斑形成細胞(PFC)的數量。亦可采用定量溶血分光光度測定法(quantitative hemolysis spectrophotometry),又稱B細胞介導紅細胞溶血的定量分光光度法。此法是根據溶血空斑試驗原理衍化而來,可用于測定由一定數量B細胞生成和分泌的抗體,在補體參與下裂解綿羊紅細胞釋放出的血紅蛋白量(OD值表示),藉以判定人卵巢癌紫杉醇耐藥株 A2780/TAXOL細胞功能。

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